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過氧化氫(H2O2)含量檢測試劑盒

H2O2 是生物體內常見的活性氧分子，主要由 SOD 和 XOD 等催化產生，由 CAT 和 POD 等催化降解。H2O2 不僅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互轉化的樞紐。一方面，H2O2 可以直接或間接地氧化細胞內核酸，蛋白質等生物大分子，并使細胞膜遭受損害，從而加速細胞的衰老和解體；另一方面 H2O2 也是許多氧化應急反應中的關鍵調節(jié)因子。 H2O2 與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復合物，在 415nm 有特征吸收。需自備的儀器和用品：可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、丙酮 100mL、濃鹽酸 5mL、研缽和冰。

過氧化氫(H2O2)含量檢測試劑盒

一、 H2O2 提取： 1. 細菌或細胞樣品的制備：收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（10 4 個）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 試劑一），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；用試劑一定容 1mL；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 2. 組織樣品的制備：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 試劑一）進行冰浴勻漿；轉移 EP 管中，用試劑一定容 1mL，8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 3. 血清（漿）樣品：直接檢測。

二、 測定步驟 1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調節(jié)波長 415nm，蒸餾水調零。 2、 將試劑二、三和四 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）水浴 10min 以上。 3、在 EP 管中按順序加入下列試劑 試劑名稱（μL） 測定 對照樣本 250 試劑一 250 試劑二 25 25 試劑三 50 50 4000g，25℃離心 10min，棄上清，留沉淀試劑四 250 250 加入試劑四溶解沉淀后，室溫靜置 5min，取 200μL 轉移微量石英比色皿或 96 孔板中測定 415nm 處吸光值 A。對照管只要做一次即可。計算 ΔA＝A 測定-A 對照。

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下 1、標準條件下測定的回歸曲線， y = 0.062x - 0.08 (x 為標準品濃度，μmol/ mL；y 為 ΔA)。 2、血清（漿）中 H2O2 含量的計算： H2O2 含量（μmol/mL）＝(ΔA＋0.08)÷0.062=16.13×(ΔA＋0.08) 3、細菌、細胞或動物組織中 H2O2 含量計算（1）按照蛋白濃度計算 H2O2 含量(μmol/mg prot)=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(V1×Cpr)=16.13×(ΔA＋0.08) ÷Cpr 需要另外測定，建議使用本公司 BCA 蛋白質含量測定試劑盒。（2）按照樣本質量計算 H2O2 含量(μmol/g 鮮重)=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(W ×V1÷V2)=16.13×(ΔA＋0.08) ÷W (3 ) 按照細菌或細胞密度計算： H2O2 含量(μmol/10 )=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(500×V1÷V2)=0.032×(ΔA＋0.08) V1：加入反應體系中樣本體積，0.25mL；V2：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細胞或細菌總數，500 萬。 b. 用 96 孔板測定 的計算公式如下 1、標準條件下測定的回歸曲線， y = 0.031x - 0.08 (x 為標準品濃度，μmol/ mL；y 為 ΔA)。 2、血清（漿）中 H2O2 含量的計算： H2O2 含量（μmol/mL）＝(ΔA＋0.08)÷0.031=32.26×(ΔA＋0.08) 3、細菌、細胞或動物組織中 H2O2 含量計算（1）按照蛋白濃度計算 H2O2 含量(μmol/mg prot)=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(V1×Cpr)=32.26×(ΔA＋0.08) ÷Cpr 需要另外測定，建議使用本公司 BCA 蛋白質含量測定試劑盒。（2）按照樣本質量計算 H2O2 含量(μmol/g 鮮重)=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(W ×V1÷V2)=32.26×(ΔA＋0.08) ÷W (3 ) 按照細菌或細胞密度計算： H2O2 含量(μmol/10 )=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(500×V1÷V2)=0.064×(ΔA＋0.08) V1：加入反應體系中樣本體積，0.25mL；V2：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細胞或細菌總數，500 萬。注意：檢測限為 1μmol/mL 或 1μmol/g 鮮重或 10nmol/mg prot

相關文獻：

《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID:
《The lncRNA Plscr4 Controls Cardiac Hypertrophy by Regulating miR-214》 作者:Lifang Lv,Tianyu Li,Xuelian Li,Chaoqian Xu,Qiushuang Liu,Hua Jiang,Yingnan Li,Yingqi Liu,He Yan,Qihe Huang,Yuhong Zhou,Mingyu Zhang,Hongli Shan,Haihai Liang 期刊:Molecular Therapy Nucleic Acids 影響因子:5.919 PMID:29499950
《Physiological and transcriptomic analysis revealed the involvement of crucial factors in heat stress response of Rhododendron hainanense》 作者:Ying Zhao,Wengang Yu,Xiangyu Hu,Youhai Shi,Yu Liu,Yunfang Zhong,Peng Wang,Shuya Deng,Jun Niu,Xudong Yu 期刊:Gene 影響因子:2.638 PMID:29604462
《Heterologous Expression of Salvia miltiorrhiza MicroRNA408 Enhances Tolerance to Salt Stress in Nicotiana benthamiana》 作者: Xiaorong Guo, Junfeng Niu * and Xiaoyan Cao  期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30544912
《Alternative splicing and translation play important roles in hypoxic germination in rice》 作者:Mo-Xian Chen,  Fu-Yuan Zhu,  Feng-Zhu Wang,  Neng-Hui Ye,  Bei Gao,  Xi Chen, Shan-Shan Zhao,  Tao Fan,  Yun-Ying Cao,  Tie-Yuan Liu,  Ze-Zhuo Su, Li-Juan Xie,  Qi-Juan Hu,  Hui-Jie Wu,  Shi Xiao,  Jianhua Zhang, Ying-Gao Liu 期刊:Journal of Experimental Botany 影響因子:5.36 PMID:30535157
《A novel Miscanthus NAC transcription factor MlNAC10 enhances drought and salinity tolerance in transgenic Arabidopsis》 作者:Kang He,Xun Zhao,Xiao yuanChi,Yiping Wang,Chunlin Jia,Hongpeng Zhang,Gongke Zhou,Ruibo Hu 期刊:J. Plant Physiol. 影響因子:2.825 PMID:30623878

北京索萊寶科技有限公司是一家從事生物學試劑及試劑盒的高科技生物企業(yè)。

總部位于北京，并在全國設有經銷或代理機構。產品因可靠而穩(wěn)定的質量和較為完善的售后服務確立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產品為保障、以誠信為基礎、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念，擁有專業(yè)的研發(fā)和質量檢測團隊以及的倉儲和物流系統(tǒng)。“Solarbio”已經得到全國科研工作者的認可，成為廣大經銷商推崇的。

公司擁有一批專業(yè)的研發(fā)人員，我們專注于生物產品的不斷完善和創(chuàng)新。產品覆蓋面廣，品質可靠。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、生物醫(yī)學等領域的多種試劑及試劑盒。同時，索萊寶公司提供各種常規(guī)生化試劑，庫存常備產品多達10000多種，可隨時為廣大科研工作者提供各類專業(yè)試劑。在質量方面，索萊寶謹記公司信念：質量高于一切。所有研發(fā)的產品都設有嚴謹的生產流程，科學的質量檢測方法和成熟的質量檢測程序，我們恪守對每一位用戶的承諾：用專業(yè)的態(tài)度做專業(yè)的品牌。同時，公司組建了一支專業(yè)的技術服務隊伍，能夠為科研工作者提供專業(yè)的技術服務。每一位購買索萊寶產品的用戶都能夠得到專業(yè)的咨詢和完善的售后服務。

索萊寶公司堅持與接軌，注重和企業(yè)的合作與交流，并提供產品代理、市場咨詢等多項服務。公司將一如既往與世界更多合作，不斷為廣大生物科研工作者提供更優(yōu)質的產品和服務。公司理念：“為科研服務，為生命盡責”。一個人能夠走多遠，取決于與誰同行。索萊寶公司期待與各同行精誠合作。 

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