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產品名稱:基因工程試劑*0感受態細胞

產品型號:C1200

產品報價:

產品特點:基因工程試劑*0感受態細胞
貨 號:C1200
規 格:10×100ul / 20×100ul
保 存:-70℃保存,運輸為干冰包裝。自收貨之日起液氮保存少一年,-70℃保存少 6 個月。
產品簡介:
本公司生產的*0 感受態細胞是采用大腸桿菌*0 菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞,可用于DNA的化學轉化。

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C1200基因工程試劑*0感受態細胞的詳細資料:

基因工程試劑*0感受態細胞
貨 號:C1200
規 格:10×100ul / 20×100ul
保 存:-70℃保存,運輸為干冰包裝。自收貨之日起液氮保存少一年,-70℃保存少 6 個月。


產品簡介:
    本公司生產的*0 感受態細胞是采用大腸桿菌*0 菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞,可用于DNA的化學轉化。使用pUC19 質粒檢測,轉化效率可達 10 8 ,-70℃保存六個月轉化效率不發生改變。
   基因型:F_ mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15△lacⅩ74 recA1 deoR araD139Δ(ara-leu)7697 galU
galK rpsL (StrR) endA1 nupG
   特點:一種用于鋪制與培養質粒平板和粘粒平板的重級缺陷的抑制型菌株。其中 φ80lacZΔM15 基因的產物可與 pUC 載體編碼的 β-半乳糖苷酶氨基端實現 α-互補,可用于藍白斑篩選。該菌株適用于高效的DNA克隆和質粒擴增,能保證高拷貝質粒的穩定遺傳。


操作方法:(以下各步驟均為無菌操作)

1,將感受態細胞置于冰上融化,以下實驗以 100ul 感受態細胞為例。
2、向感受態細胞懸液中加入需轉化的目的 DNA,注意目的 DNA 的體積不要超過感受態細胞懸液體積的十分之一,輕輕旋轉離心管以混勻內容物,冰浴放置 30 分鐘。
3、將離心管置于 42℃水浴中 60-90 秒,然后快速轉移到冰浴中放置 2-3 分鐘,注意不要搖動離心管。
4、向離心管中加入 500ul 無菌無抗的 SOC 或 LB 培養基,37℃ 180rpm 振蕩培養 1 小時。目的是使質粒上相關的抗性標記基因表達,使菌體復蘇。
5、取適量已轉化的感受態細胞涂布含相應抗生素的 SOC 或 LB 平板,37℃倒置培養 12-16 小時。涂布用量可根據具體實驗來調整,如轉化的 DNA 總量較多,可取 100ul 左右的轉化產物涂板;反之,如轉化的 DNA總量較少,可取 200-300ul 的轉化產物涂板。過多菌液可以抑制細菌生長。如果預計的克隆較少,可通過離心后吸除部分培養液,懸浮菌體后將其涂布于一個平板中。涂布剩余的菌液可 4℃保存,如果次日的轉化菌落數過少可以將剩下的菌液再涂布新的平板。


注意事項:

1、感受態細胞應保存在-70℃,不可反復凍融,否則其轉化效率將會降低。
2、實驗過程中應嚴格無菌操作,防止其它 DNA 或雜菌的污染,避免為以后的篩選、鑒定帶來影響。
3、轉化時,轉化效率與外源 DNA 的濃度在一定范圍內成正比,但當加入的外源 DNA 量過多或體積過大
反而會降低轉化效率。轉化時 DNA 體積要小于感受態細胞體積的十分之一。
4、轉化率的計算:轉化率=產生菌落的總數/鋪板 DNA 總量。
5、為防止轉化實驗不成功,可以保留部分連接產物,以重新轉化,將損失降到低。


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I1020  IPTG 溶液 (50mg/ml)
A1170 氨芐青霉素儲存液 (100mg/ml)
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L1015  LB 固體培養基 ( 干粉 )
L1020  SOC 液體培養基 ( 干粉)

 

基因工程試劑*0感受態細胞訂購說明:

1、絕大部分產品備有現貨,一般情況下都能訂貨當日發貨。 
2、部分非常用產品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。 
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運輸說明:

1、極低溫產品:極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品:低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產品:常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。

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