微量法 淀粉含量檢測試劑盒

產品名稱: 淀粉含量檢測試劑盒 微量法

產品英文名: Micro Starch Content Assay Kit

產品貨號：BC0705        產地：北京市通州區馬駒橋聯東U谷8三樓

產品規格：100管/96樣     產品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：560
庫存狀態：現貨                          
關鍵字: 淀粉含量檢測試劑盒|淀粉檢測試劑盒|淀粉|試劑盒

簡要介紹：
淀粉是植物中糖的主要儲存形式，其含量測定對于評價食品營養價值和調查植物體內糖代謝都有重要意義。利用80％乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開，進一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖，采用蒽酮比色法測定葡萄糖含量，即可計算淀粉含量。

產品詳細描述
產品內容：
試劑一：液體100mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體35mL×1瓶，4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。

產品說明：
淀粉是植物中糖的主要儲存形式，其含量測定對于評價食品營養價值和調查植物體內糖代謝都有重要意義。
利用80％乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開，進一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖，采用蒽酮比色法測定葡萄糖含量，即可計算淀粉含量。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、玻璃比色皿、研缽、冰、濃硫酸和蒸餾水。

操作步驟：
一、淀粉提取：

1. 稱取0.1g-0.2g樣品（建議稱取約0.1g樣本）于研缽中研碎，加入1mL試劑一，充分勻漿后轉移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，常溫離心5min，棄上清，留沉淀。
2. 沉淀中加入0.5mL蒸餾水，放入95℃水浴中糊化15min（蓋緊，以防止水分散失）。
3. 冷卻后，加入0.35mL試劑二，25℃提取15min，振蕩3-5次。
4. 加入0.85mL雙蒸水，混勻，3000g，25℃離心10min，取上清液待測。

二、測定操作表：

1. 分管光度計預熱30min以上，調節波長620nm，蒸餾水調零。
2. 調節水浴鍋 95度。
3. 工作液的配制：臨用前在試劑三中加入3.75mL蒸餾水后，緩慢加入21.25mL濃硫酸，不斷攪拌，充分溶解，待用。用不完的試劑4℃保存一周。
4. 樣本測定：取50μL樣本和250μL工作液EP管中，95度水浴10min（蓋緊，防止水分散失），自然冷卻室溫，取200μL微量石英比色皿或96孔板中，在620nm波長下記錄測定吸光值A。

三、淀粉含量計算：
A、用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 5.872x - 0.0295；x為標準品濃度（mg/mL），y為吸光值。

1. 按照蛋白濃度計算

淀粉含量（mg/mg prot）＝﹝(A+0.0295)×V1﹞÷5.872÷(V1×Cpr) =0.17×(A+0.0295) ÷Cpr

2. 按樣本鮮重計算

淀粉含量（mg/g 鮮重）＝ ﹝(A+0.0295)×V1﹞÷5.872÷ (W×V1÷V2) =0.289×(A+0.0295) ÷W
V1：加入反應體系中樣本體積，0.05mL；V2：加入提取液體積，1.7 mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g。
B、用96孔板測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 2.936x - 0.0295；x為標準品濃度（mg/mL），y為吸光值。

3. 按照蛋白濃度計算

淀粉含量（mg/mg prot）＝﹝(A+0.0295)×V1﹞÷2.936÷(V1×Cpr) =0.34×(A+0.0295) ÷Cpr

4. 按樣本鮮重計算

淀粉含量（mg/g 鮮重）＝ ﹝(A+0.0295)×V1﹞÷2.936÷ (W×V1÷V2) =0.578×(A+0.0295) ÷W
V1：加入反應體系中樣本體積，0.05mL；V2：加入提取液體積，1.7 mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g。
注意事項：

1. 由于工作液具有強腐蝕性，請謹慎操作。
2. 若吸光值大于1，請將樣本用提取液稀釋后再測定，計算公式中乘以相應的稀釋倍數。
3. 提取液的配置：0.35mL試劑二+1.35mL水。用多少按照此比例配多少。
4. 低檢測限為10μg/g 鮮重或100ng/mg prot。

相關文獻：
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《Giant Pandas Are Macronutritional Carnivores》 作者:Yonggang Nie,Fuwen Wei 5,Wenliang Zhou,Yibo Hu,Alistair M. Senior,Qi Wu,Li Yan,David Raubenheimer 期刊:Curr. Biol. 影響因子:9.193 PMID:31056385

 

微量法 淀粉含量檢測試劑盒