產(chǎn)品名稱:Quick免疫印記套裝Westren Blot
產(chǎn)品型號:A1850
產(chǎn)品特點:Quick免疫印記套裝Westren Blot本產(chǎn)品含10×快速轉(zhuǎn)膜液500mL、封閉液100mL、抗體稀釋液200mL、10×洗滌液100mL,可以進行10張NC膜/PVDF膜的轉(zhuǎn)印實驗
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Quick免疫印記套裝Westren Blot是一種包含了Western blot實驗過程中常用的新一代改良的快速轉(zhuǎn)膜液、無蛋白快速封閉液、抗體稀釋液(通用型)以及洗滌液組成的溶液套裝。轉(zhuǎn)膜液、封閉液和抗體稀釋液效果優(yōu)于傳統(tǒng)的同類產(chǎn)品,具有使用時間短、兼容性好、特異性高、安全無毒害等優(yōu)點,大大縮短了Western blot實驗時間,節(jié)省實驗成本。
產(chǎn)品特色
? 實現(xiàn)快速轉(zhuǎn)膜,5-30min 可以完成轉(zhuǎn)膜過程;
? 實現(xiàn)快速封閉,5-15min 完成封閉,封閉性強、背景低、特異性好;
? 體系兼容性好,可用于 Tris-Gly 體系、Hepes 體系、Bis-Tris 體系等凝膠;
? 安全無毒,本套裝溶液不含甲醇,后期無需添加甲醇等有毒試劑;
? 套裝不含血清、白蛋白和動物源成分,確保較高信噪比;不含磷酸鹽成分,不影響堿性磷酸酶的活性;不含防腐劑,兼容 HRP、AP 標記以及s物素化抗體的檢測。
Quick免疫印記套裝Westren Blot使用說明
1. 快速轉(zhuǎn)膜液
a. 1×快速轉(zhuǎn)膜液的配制:取 10×轉(zhuǎn)膜液,規(guī)格 100mL+無水乙醇 100mL+去離子水 800mL,最后用水補充至 1L,混勻 4℃?zhèn)溆谩?/p>
b. 準備轉(zhuǎn)印膜及凝膠,并組裝好轉(zhuǎn)印設(shè)備。
c. 轉(zhuǎn)印槽中加入 1×快速轉(zhuǎn)膜液,設(shè)定恒流 400mA,5-30min 即可完成轉(zhuǎn)膜。對于大分子量蛋白可適當增加轉(zhuǎn)膜時間。若轉(zhuǎn)膜時間大于 30min,僅在轉(zhuǎn)膜槽內(nèi)用冰盒降溫即可,如下。
目的蛋白≤25kDa,采用恒流 400mA,轉(zhuǎn)膜時間 5-10min
25kDa<目的蛋白≤50kDa,采用恒流 400mA,轉(zhuǎn)膜時間 10-20min
50kDa<目的蛋白≤75kDa,采用恒流 400mA,轉(zhuǎn)膜時間 20-30min
75kDa<目的蛋白≤100kDa,采用恒流 400mA,轉(zhuǎn)膜時間 30-40min
目的蛋白>100kDa,采用恒流 400mA,轉(zhuǎn)膜時間按速率 2.5kDa/min 計算
2. 快速封閉液
a. 完成轉(zhuǎn)膜后,將膜移入到平皿或者其他適合的容器中(可以不洗滌膜)。
b. 根據(jù)膜的大小,加入適量體積的無蛋白快速封閉液,確保充分浸沒覆蓋膜,對于 7.5×8cm 的膜推薦使用量 5-10mL。
c. 置于水平搖床上,室溫條件下振蕩孵育 10-15min。
d. 取出封閉完成的膜,用 1×洗滌液(10×洗滌液用純水稀釋至 1×即可)沖洗膜 2-3 次,即可用于一抗孵育等后續(xù) Western blot 實驗。
3. 抗體稀釋液參考所用一抗/二抗的說明,以及樣品中目的蛋白的含量,按照適當比例,如 1:1000、1:500 等稀釋一抗/二抗,稀釋后即可直接用于 Western blot。
注意事項
? 取放 PVDF 膜和 NC 膜應(yīng)使用平頭鑷子,并僅輕輕夾取其邊角,操作過程須避免膜表面產(chǎn)生劃痕、折痕或壓痕等痕跡。
? PVDF 膜一經(jīng)浸潤和活化,需一直保持濕潤,根據(jù) Western blot 進行到的具體步驟可放置于Western blot 轉(zhuǎn)膜液或洗滌液等適當溶液中,否則可能會產(chǎn)生難以封閉的異常背景。
? 本產(chǎn)品所用轉(zhuǎn)膜液為快速型,需根據(jù)目的蛋白大小調(diào)整轉(zhuǎn)膜時間,防止蛋白穿過膜。
? 由于沒有任何一種封閉液是適用于所有實驗體系的,因此對于一些特殊的實驗,可能需要根據(jù)具體情況考慮使用其它更合適的封閉液。
? 套裝溶液中的任何一種產(chǎn)品,均可以在 Western 實驗中獨立使用,不影響最終效果。
? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
? 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
蛋白樣本制備 | ||||
裂解液 | ||||
商品貨號 | SKU | 商品名稱 | 商品品牌 | 規(guī)格 |
R0010 | R0010-100ml | 高效RIPA裂解液(組織/細胞) | Solarbio | 100ml |
R0020 | R0020-100ml | 普通RIPA裂解液(組織/細胞) | Solarbio | 100ml |
R0030 | R0030-100ml | 非變性組織/細胞裂解液 | Solarbio | 100ml |
緩沖鹽溶液 | ||||
商品貨號 | SKU | 商品名稱 | 商品品牌 | 規(guī)格 |
P1020 | P1020-500ml | 1×PBS緩沖液(pH7.2-7.4) | Solarbio | 500ml |
H1095 | H1095-500ml | 1MHepes(pH7.2-7.4). | Solarbio | 500ml |
T1020 | T1020-500ml | 1MTris-HCl緩沖液(pH6.8) | Solarbio | 500ml |
助溶劑、表面活性劑 | ||||
商品貨號 | SKU | 商品名稱 | 商品品牌 | 規(guī)格 |
N8032 | N8032-100ml | NP-40裂解液 | Solarbio | 100ml |
T8220 | T8220-500ml | 吐溫-20 | Solarbio | 500ml |
P1033 | P1033-500ml | 10×PBST | Solarbio | 500ml |
U8020 | U8020-500g | 尿素 | Solarbio | 500g |
T8200 | T8200-500ml | 曲拉通TritonX-100 | Solarbio | 500ml |
D8331 | D8331-25g | 脫氧膽酸鈉 | Solarbio | 25g |
T1085 | T1085-500ml | 1×TBST緩沖液 | Solarbio | 500ml |
G8070 | G8070-100g | 鹽酸胍 | Solarbio | 100g |
酶抑制劑 | ||||
商品貨號 | SKU | 商品名稱 | 商品品牌 | 規(guī)格 |
A8260 | A8260-5mg | 白酶抑制劑 | Solarbio | 5mg |
P8100 | P8100-5mg | 胃D白酶抑制劑 | Solarbio | 5mg |
P1260 | P1260-1ml | 蛋白磷酸酶抑制劑混合物(All-in-one,100x) | Solarbio | 1ml |
T8031 | T8031-100mg | 胰D白酶抑制劑 | Solarbio | 100mg |
超聲處理,低溫超速離心 | ||||
商品貨號 | SKU | 商品名稱 | 商品品牌 | 規(guī)格 |
BC3711 | BC3711-50T | 全蛋白提取試劑盒(中) | Solarbio | 50T |
BC3730 | BC3730-50T | 磷酸化蛋白提取試劑盒 | Solarbio | 50T |
蛋白定量 | ||||
商品貨號 | SKU | 商品名稱 | 商品品牌 | 規(guī)格 |
PC0020 | PC0020-50T | BCA蛋白濃度測定試劑盒500微孔 | Solarbio | 50T(500微孔) |
PC0030 | PC0030-100T | Lowry法蛋白濃度測定試劑盒-1000微孔(100T) | Solarbio | 100T(1000微孔) |
PC0010 | PC0010-100T | Bradford法蛋白濃度測定試劑盒 | Solarbio | 100T(2500微孔) |
凝膠制備和上樣 | ||||
凝膠制備 | ||||
商品貨號 | SKU | 商品名稱 | 商品品牌 | 規(guī)格 |
P1200 | P1200-50T | SDS-PAGE凝膠制備試劑盒 | Solarbio | 50T |
上樣 | ||||
商品貨號 | SKU | 商品名稱 | 商品品牌 | 規(guī)格 |
P1015 | P1015-10ml | 4×蛋白上樣緩沖液(含DTT) | Solarbio | 10ml |
P1016 | P1016-10ml | 4×蛋白上樣緩沖液(含巰基還原劑) | Solarbio | 10ml |
P1017 | P1017-10ml | 4×非變性蛋白上樣緩沖液 | Solarbio | 10ml |
P1018 | P1018-10ml | 2×蛋白上樣緩沖液(含DTT) | Solarbio | 10ml |
P1019 | P1019-10ml | 2×蛋白上樣緩沖液(含巰基還原劑) | Solarbio | 10ml |
PR1900 | PR1900-20T | 預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker(3.3kD-31.0kD) | Solarbio | 20T |
PR1910 | PR1910-20T | 彩虹180廣譜蛋白Marker(11-180KD) | Solarbio | 100ul |
PR1920 | PR1920-20T | 彩虹245廣譜蛋白Marker(11-245KD) | Solarbio | 100ul |
PR1930 | PR1930-20T | 彩虹245plus廣譜蛋白Marker(5-245KD) | Solarbio | 100ul |
SDS-PAGE凝膠電泳 | ||||
商品貨號 | SKU | 商品名稱 | 商品品牌 | 規(guī)格 |
T1010 | T1010-500ml | 1.5MTris-HCl緩沖液(pH8.8) | Solarbio | 500ml |
T1020 | T1020-500ml | 1MTris-HCl緩沖液(pH6.8) | Solarbio | 500ml |
S1010 | S1010-500ml | 10%SDS溶液 | Solarbio | 500ml |
T1070 | T1070-500ml | 5×Tris-甘A酸電泳緩沖液 | Solarbio | 500ml |
P1300 | P1300-500ml | 考馬斯亮藍快速染色液 | Solarbio | 500ml |
P1305 | P1305-1Kit | 考馬斯亮藍染色套裝(染色液+脫色液) | Solarbio | 100ml+500ml |
轉(zhuǎn)膜 | 目的蛋白>25kg選0.45um的nc膜,目的蛋白<25kg選0.22um的nc膜 | |||
商品貨號 | SKU | 商品名稱 | 商品品牌 | 規(guī)格 |
YA1711 | YA1711-1EA | 硝酸纖維素膜NC膜(0.45um) | Solarbio | 15cm*20cm |
YA1701 | YA1701-1EA | PVDF膜(0.45um)13.25*15cm | Solarbio | 13.25*15 |
YA1700 | YA1700-1EA | PVDF膜(0.22um)13.25*15cm | Solarbio | 13.25*15 |
YA1710 | YA1710-1EA | 硝酸纖維素膜(NC膜0.22um) | Solarbio | 15cm*20cm |
封閉 | ||||
商品貨號 | SKU | 商品名稱 | 商品品牌 | 規(guī)格 |
T1085 | T1085-500ml | 1×TBST緩沖液 | Solarbio | 500ml |
D8340 | D8340-100g | SkimMilk脫脂奶粉 | Solarbio | 100g |
SW3015 | SW3015-100ml | 5%BSA封閉液 | Solarbio | 100ml |
抗體孵育 | ||||
商品貨號 | SKU | 商品名稱 | 商品品牌 | 規(guī)格 |
T1085 | T1085-500ml | 1×TBST緩沖液 | Solarbio | 500ml |
P1002 | P1002-100PCS | D-PBS片劑,杜氏磷酸鹽緩沖液(不含鈣鎂) | Solarbio | 100PCS |
SW3010 | SW3010-500ml | 膜封閉液 | Solarbio | 500ml |
A1800 | A1800-100ml | 抗體稀釋液(普通型) | Solarbio | 100ml |
A1810 | A1810-50ml | 一抗稀釋液 | Solarbio | 50ml |
A1820 | A1820-50ml | HRP標記抗體稀釋液 | Solarbio | 50ml |
A1830 | A1830-50ml | AP標記抗體稀釋液 | Solarbio | 50ml |
A1840 | A1840-100ml | 熒光抗體稀釋液 | Solarbio | 100ml |
顯影與曝光 | ||||
商品貨號 | SKU | 商品名稱 | 商品品牌 | 規(guī)格 |
SW2010 | SW2010-1kit | ECL化學發(fā)光法檢測試劑盒(小鼠IgG) | Solarbio | 1盒 |
SW2020 | SW2020-1kit | ECL化學發(fā)光法檢測試劑盒(兔IgG) | Solarbio | 1盒 |
SW2030 | SW2030-1kit | ECL化學發(fā)光法檢測試劑盒(山羊IgG) | Solarbio | 1盒 |
SW2040 | SW2040-1kit | ECL化學發(fā)光法檢測試劑盒(小鼠/兔IgG) | Solarbio | 1盒 |
SW2050 | SW2050-1kit | Westernblotting(人IgG)ECL化學發(fā)光法檢測試劑盒 | Solarbio | 一盒 |
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